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Tissuelyser-48擬南芥或水稻穗RNA快速提取步驟兩種方法

更新時間：2012-10-11   更新時間：2012-10-11   點擊次數(shù)：3755次

*種 濕磨法

1.取打碎機適配器于-80°冷凍約15min。
2.取一指節(jié)長度的花序，好帶上一片葉子，（材料量可多可少，7d大小的苗地上部分也能提出RNA），放入國產(chǎn)2ml EP管中， 加一粒鋼珠，液氮速凍。之后用鑷子取出，快速加入適配器中。（好用國產(chǎn)的EP管即可，進口的管子液氮凍過后，容易裂）
3.打碎15s，50HZ。（水稻嫩葉為。45S，60HZ 老葉為，70S 60HZ）
4.將材料再次放入液氮中。
5.用磁鐵吸出鋼珠，加入1ml Trizol，余下步驟即正常的RNA提取步驟。

第二種 干磨法

1.取一指節(jié)長度的花序（材料量可多可少，7d大小的苗地上部分也能提出RNA），放入國產(chǎn)2ml EP管中，加一粒鋼珠，400ul Trizol。
2.打碎1min 50HZ （水稻嫩葉為。45S，60HZ 老葉為，70S 60HZ） 。
3.吸出鋼珠，補600ul Trizol。
4.余下步驟即正常的RNA提取步驟。
注意：鋼珠遇到Trizol 會被溶解一部分，所以之后的提取液是黃色的（有鐵離子），不必在意，之后異丙醇那一步鐵離子會和上清一起別棄掉。

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